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分析鉴定牛源多杀性巴氏杆菌
北纳生物 2018-12-20

多杀性巴氏杆菌

<多杀性巴氏杆菌>

原标题:牛源多杀性巴氏杆菌的分离与初步鉴定

林立山,黄秦,才灵杰,马家乐,姚火春,潘子豪

摘要:[目的]本研究旨在对引起犊牛呼吸道综合征的多杀性巴氏杆菌进行分离鉴定,分析其亲缘关系和毒力基因的分布情况。

[方法]收集2017年8月至2018年4月疑似患有犊牛呼吸道综合征的病牛鼻拭子进行细菌分离培养,对菌落形态和染色疑似巴氏杆菌的菌株进行16S rRNA测序和血清型鉴定,选择巴氏杆菌7类23种毒力基因,筛查临床分离株的毒力基因的分布。

[结果]从8个省份的237份病料中分离出31株多杀性巴氏杆菌,分离率为13.1%。16S rRNA测序分析表明31株A型多杀性巴氏杆菌属于同一亚群,其序列同源性与中国分离株HB01以及国外分离株USDA-ARS-USMARC-60712、USDA-ARS-USMARC-60214、ATCC 43137以及36950亲缘关系较近。对分离出的31株A型多杀性巴氏杆菌的7类共23种毒力基因鉴定,结果显示31株多杀性巴氏杆菌所携带的毒力因子大多分布在17-19个,且集中度较高。

[结论]A型多杀性巴氏杆菌为犊牛呼吸道综合症的主要流行血清型,通过对多杀性巴氏杆菌的临床分离株进化树和毒力基因分析,内蒙古、黑龙江、新疆、山西以及河北的7株分离株进化来源于同一分支,且均缺失毒力基因tadD和hgbA及携带毒力基因hsf-1,提示着其亲缘关系可能与其携带的特定毒力基因存在一定相关性。该研究为犊牛呼吸道综合征的病原学调查和多杀性巴氏杆菌流行病学调查提供了参考数据。

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是一种革兰氏阴性短杆菌,临床上能引起包括牛、羊、猪等在内的多种动物发病。根据其荚膜抗原差异,多杀性巴氏杆菌可分为A、B、D、E、F等5种血清型。关于多杀性巴氏杆菌的致病性以及毒力因子的研究报道较多,目前已被鉴定出的毒力因子包括黏附素(ptfA等)、铁摄取调节蛋白(exbB等)、胞外蛋白酶(nanB等)、脂多糖及外膜蛋白等。

多杀性巴氏杆菌是一种能引起牛呼吸道综合征(Bovine respiratory disease complex,BRDC)的细菌性病原。牛呼吸道综合征(BRDC),俗称“运输热”,是由于应激作用等因素引起牛出现肺炎、支气管炎等疾病的统称。此外,研究还发现多杀性巴氏杆菌能与牛类支原体生物(Mycoplasma-like organisms)、牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza type 3 virus)等牛呼吸道综合征其他相关病原发生混合感染。因此,由多杀性巴氏杆菌引起的牛呼吸道综合征对于我国乃至全球养牛业发展都造成了巨大的经济损失。本研究采集2017年8月至2018年4月份疑似患有呼吸道综合征的犊牛病料,分离疑似多杀性巴氏杆菌的临床菌株,通过血清型PCR鉴定方法和绘制16S rRNA的系统进化树对细菌进行分析,并检测了7类共23种毒力基因在牛源多杀性巴氏杆菌中的分布情况。

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